A hepatitis C PCR-elemzése

A vírusos hepatitis C az egyik legveszélyesebb és legnehezebben diagnosztizálható betegség. A probléma az, hogy gyakran ezt a betegséget csak a későbbi szakaszokban észlelik, mivel fő formája krónikus, a CHC pedig tünetmentes. A korai diagnózis azonban lehetővé teszi a legmegfelelőbb kezelés kiválasztását, amely segít örökre megfeledkezni a vírusos májgyulladásról..

Az egyik legsokoldalúbb módszer a HCV meghatározására a polimeráz láncreakció (PCR). De mi a hepatitis C PCR-elemzése? Milyen jellemzői vannak ennek a tesztelésnek? Miben különbözik minőségileg a hepatitis C PCR-analízise a kvantitatívtól? Hogyan megfejtik a teszt eredményét? E kérdésekre válaszokat talál cikkünkben..

A HCV diagnosztikája PCR-rel

A polimeráz láncreakció az egyik leggyakoribb és legpontosabb módszer a HCV diagnosztizálására. De mit mutat a hepatitis C PCR-vizsgálata? A vizsgálati eredmények lehetővé teszik a flavavírus jelenlétének meghatározását a gazdaszervezetben, valamint a vírusterhelés mértékét a testében..

Az elemzéshez a vizsgálat napján vett, a beteg vénás véréből vett mintát használják. A hepatitis C PCR-tesztjének elvégzése az alábbi emberek kategóriáinak ajánlott:

  • A HCV kórokozójának antigénjeivel szemben kimutatott immunglobulinokat tartalmazó betegek
  • Nőknek terhesség alatt
  • Orvosi dolgozók, akik folyamatosan érintkeznek a fertőzött testfolyadékokkal
  • Azok a betegek, akiknek kórtörténetében korábban gyógyult vírusos hepatitis volt
  • A májkárosodás nyilvánvaló tüneteivel rendelkező betegek

A hepatitis C PCR teszt lehet kvalitatív vagy kvantitatív. Mindkét módszert aktívan alkalmazzák a HCV diagnózisában. Vizsgáljuk meg részletesebben a hepatitis C kvalitatív és kvantitatív PCR elemzésének jellemzőit.

Minőségi tesztelés

Minőségi választ akkor hajtanak végre, ha egy korábban megállapított HCV diagnózis megerősítést igényel. A teszt eredményei lehetnek pozitívak vagy negatívak. A pozitív reakció egy fertőző ágens jelenlétét jelzi az alany testében. Viszont a negatív eredmény vagy a kórokozó hiányát, vagy annak jelentéktelen koncentrációját jelzi..

Mi a hepatitis PCR-je (kvalitatív típusú vizsgálat)? Ez a teszt segít a diagnózis végleges meghatározásában. A moszkvai megvalósítás költsége a klinikától függően 1800 és 3000 rubel között változik.

Mennyiségi válasz

A kvantitatív polimeráz láncreakcióhoz vért adnak, ha a diagnózis már megállapításra került. Az elemzés lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a beteg testének patogén terhelését abban a pillanatban. Így a kezelőorvos információt kap arról, hogy a máj melyik területét érinti a flavavírus, és kiválaszthatja az adott esetben szükséges terápiás rendet..

Minél magasabbak a kórokozó paraméterei a beteg vérében, annál súlyosabb betegség kezelési szakaszát kell kezelni. A kvantitatív polimeráz láncreakció költségei a moszkvai klinikákon 1800 és 4000 rubel között mozognak, az orvosi létesítmény választásától függően.

Felkészülés a Hepatitis C PCR tesztre

Tehát a válasz a "Mi a hepatitis C PCR-elemzése?" Kérdésre megtalált. De hogyan készülsz fel a közelgő diagnózisra? Amikor vérmintát adnak egy hepatitis C PCR-vizsgálatra, a betegnek:

  • Néhány nappal a laboratóriumba érkezés előtt teljesen hagyja el a gyorséttermet és az egyéb nehéz és zsíros ételeket
  • A hepatitis C PCR-tesztje előtt 24 órán belül ne igyon alkoholt, és tartózkodjon a dohányzástól
  • Ne egyél 8 órán keresztül a diagnózis előtt
  • Saját biztonsága érdekében, mielőtt az injekciós tűt vénába tenné, győződjön meg arról, hogy az egészségügyi dolgozó csak steril eldobható fecskendőt használ

Nagyon kevés vért vesznek fel a polimeráz láncreakcióhoz. Ezért az eljárás után a betegnek nincs szüksége rehabilitációra. Ezért a beavatkozás után azonnal a beteg hazamegy. A diagnosztikát reggel végezzük.

Dekódoló PCR elemzés

A hepatitis C PCR-tesztjének dekódolását orvosi laboratóriumban végzik. A végső eredmények hibahatára az egészségügyi dolgozók kompetenciájától, valamint attól függ, hogy az alany hogyan követte a tesztre való felkészülés szabályait..

A hepatitis C kvalitatív PCR-elemzése esetén fontos figyelembe venni a reagensek érzékenységi küszöbét, amely 10-500 NE / ml-en belül ingadozik. Egy jó minőségű polimeráz láncreakciónak csak 2 eredménye lehet:

  • Pozitív. A vírusos hepatitis C diagnózisát megerősíti a flavavírus kimutatása a beteg vérében. A kórokozó koncentrációja a vérplazmában elegendő a diagnózis felállításához. Ha a diagnózist a kezelés után hajtották végre, akkor egy ilyen eredmény a terápia hatástalanságát jelzi..
  • Negatív. A kórokozó hiányzik, vagy koncentrációja a vérben rendkívül alacsony. Egy ilyen eredmény nem mindig jelzi a fertőzés hiányát. Az alanynak javasoljuk, hogy tegyen további teszteket a reagensekkel szembeni érzékenységre.

Ahhoz, hogy megtudja, mit mutat a hepatitis C PCR-elemzése a kvantitatív tesztelés során, a középső mutatótól kell indulnia, amely egyenlő 8x10 ^ 5 NE / ml (800 000 NE / ml).

Ha a kórokozó terhelés szintje alacsonyabb vagy egyenlő az átlaggal, akkor a pácienst gyógyszeres terápiára írják fel közvetlen antivirális hatású gyógyszerek alapján. Ha ez a szám meghaladja a 800 000 egységet, a kezelőorvosnak komolyabb intézkedéseken kell gondolkodnia a HCV elleni küzdelemben. A betegnek májtranszplantációra lehet szüksége.

A vírusos hepatitis C PCR-rel történő meghatározását a főváros számos orvosi intézményében végzik. Ugyanakkor a tesztek elvégezhetők mind fekvőbeteg, mind ambuláns körülmények között..

A hepatitis C PCR-elemzése: hol és hogyan kell helyesen átadni, ami pozitív és negatív eredményt jelent

A hepatitis C PCR-je kötelező elemzés a májkárosodás tüneteivel rendelkező betegek vizsgálatakor. A vizsgálatot a diagnózis megerősítésére és a legteljesebb információk megszerzésére írják fel a betegség kórokozójáról, a vírusfertőzés aktivitásáról. Az eredmények szolgálnak alapul az antivirális terápia felírásához, annak időtartamának meghatározásához és hatékonyságának értékeléséhez..

A polimeráz láncreakciót alkalmazó diagnosztika viszonylag nemrégiben terjedt el. A témával kapcsolatos kutatásokat az 1970-es évek közepe óta folytatják. De az első publikációk a PCR gyakorlati orvoslásban való alkalmazásának lehetőségéről csak az 1980-as évek közepén jelentek meg..

  • A PCR típusai
  • A teszt indikációi
  • Hova vigye?
  • Véradás szabályai
  • Az eredmények dekódolása
  • A PCR diagnosztika előnyei
  • A költség

A PCR magyarázatakor az orvosok hangsúlyozzák, hogy ez a legmegbízhatóbb és legmegbízhatóbb elemzés a hepatitis C esetében. Ez a teszt nemcsak a vírus RNS-részecskéinek azonosítását teszi lehetővé, hanem annak koncentrációját (a fertőző folyamat aktivitását jelzi) és a genotípust is. A kapott eredmények kulcsfontosságú szerepet játszanak a további terápia taktikájának és sémájának meghatározásában..

Mi a lényege a reakció megrendezésének? Bizonyos biológiailag aktív anyagok segítségével kis vértérfogatban megnő a vírus RNS-részecskéinek száma. Ezt követően a genom egyes részeit különféle fizikai-kémiai módszerekkel határozzuk meg.

A PCR-t több komponens felhasználásával hajtják végre:

  • Alapozó. Ez egy mesterségesen szintetizált vegyület, amelyben a nukleotidszekvencia teljesen megegyezik a vírus RNS-ének egy meghatározott régiójával, amely nem megy át mutációkon és változásokon a genotípustól függően. A hepatitis C vírus RNS-ét szigorúan specifikus primer alkalmazásával határozzuk meg.
  • RNS-polimeráz. Olyan enzim, amelyet stabilitás és szerkezeti stabilitás jellemez a kémiai reakció helyes lefolyásához szükséges hőmérsékleti változások hátterében. Biztosítja az RNS-lánc felépítését a PCR egyik szakaszában.
  • Fehérje keverék. Az RNS további szakaszainak felépítéséhez "építőanyagra" van szükség, amelyhez a fehérje szerkezetének bizonyos vegyületeit hozzáadják a biológiai mintához.
  • Puffer. Az optimális pH-szintet fenntartó keverék a polimeráz láncreakció áramlásának biztosításához.
  • Biológiai anyagminta, amelyről feltételezhető, hogy HCV (Hepatitis C vírus) RNS mintát tartalmaz.

A PCR stádiumának egyes módszereiben RNS-próbákat és egyéb belső kontrollokat alkalmaznak, amelyeket kontrollmintaként használnak az eredmények azonosításakor.

A vírusos RNS régióinak mátrix segítségével történő növelésének folyamatát amplifikációnak nevezzük. A reakció több szakaszban halad:

  1. Denaturáló. Az RNS-szálak "letekerésének" folyamatát a hőmérséklet bizonyos szintre emelésével biztosítjuk.
  2. Lágyítás. Miután a hőmérsékletet a kívánt értékre csökkentették, az alapozók az RNS-hez kapcsolódnak. Ez a szakasz csak akkor lehetséges, ha a kívánt vírusrészecskék vannak a vérmintában..
  3. Vírusos RNS régiók közvetlen szintézise enzimek részvételével.

A felsorolt ​​PCR stádiumozási ciklusokat több tucatszor ismételjük meg, ami a hepatitis C kórokozó RNS régióinak számának többszörös növekedését biztosítja a laboratóriumi módszerekkel meghatározott szintig.

A vérmintát a vizsgálat előtt megfelelően előkészítik. A benne lévő RNS-t egy hordozó pufferbe adszorbeálják, majd lemossák és felhasználják a polimeráz láncreakció megindításához.

Az eredmények detektálását elektroforézissel (vízszintes vagy függőleges) vagy hibridizációval végezzük. A reakció eredményeinek dekódolására szolgáló módszert a vizsgálat célkitűzései alapján választjuk meg (egyszerűen azonosítjuk az RNS-t, vagy meghatározzuk annak hozzávetőleges mennyiségét)..

PCR - a hepatitis C legpontosabb vérvizsgálata

A HCV-vel kapcsolatos javasolt vizsgálatok listája számos elemet tartalmaz, amelyek különböznek a költségektől, a készültségi időtől és a megvalósítás módjától..

Ha az Egészségügyi Világszervezet (WHO) protokolljaira hivatkozunk, akkor a fertőzés diagnosztizálásának eljárása több egymást követő szakaszból áll..

Először is bérelnek:

  • a vér és a vizelet általános elemzése;
  • vér biokémia;
  • kutatás a glükóz tartalomról (szigorúan éhgyomorra);
  • HIV-teszt;
  • fluorográfia;
  • immunogram (ha autoimmun patológiák jelenlétére gyanakszik).

Ha a biokémiai vérvizsgálat paraméterei eltérnek a fiziológiai normától, a páciensnek vizsgálatot írnak elő, amely a vírus vérrel való érintkezésekor termelődő specifikus antitestek kimutatásán alapul (ELISA).

De a hepatitis C ilyen vérvizsgálata jelentős hátránnyal jár. Az antitestszintézis folyamata az immunkompetens sejtek működésétől és termelésétől függ. A test egyéni tulajdonságai hamis negatív és hamis pozitív válaszokat egyaránt okozhatnak..

Mielőtt ELISA tesztet írna fel, az orvos elmondja a betegnek egy esetleges hibát, amely felvet egy válaszkérdést: "Milyen vérvizsgálat mutatja a hepatitis C-t minimális kockázattal a helytelen eredmények elérésében?" A diagnózis megerősítésére vagy cáfolására a legpontosabb laboratóriumi vizsgálat a valós idejű PCR.

A további cselekvési taktikák attól függnek, hogy a kutatás mit mutat. Ha a diagnózis beigazolódik, a beteget azonnal hepatoprotektorokra írják fel, figyelmeztetik a megfelelő táplálkozás és az egészséges életmód fontosságára. De a célzott terápia lehetetlen a vírusterhelés és a hepatitis C genotípus meghatározása nélkül..

Egyes gyógyszerek provokálhatják a hepatitis B súlyosbodását. Ezért a szövődmények kizárása érdekében a HBsAg-teszteket is előírják. A HCV-t csak negatív vizsgálati eredmény után kezelik.

Fajok: Minőségi, mennyiségi és genotipizálás

A hepatitis C kezdeti diagnózisában a termelt ellenanyagok titerét a szerológiai módszerrel határozzák meg. Ez az eredmény nagyjából mutatja a kóros folyamat aktivitását. De az orvos csak a PCR-adatok tanulmányozása után kaphatja meg a legpontosabb információkat.

Jelenleg szinte az összes laboratóriumban ultraiérzékeny módszerrel végzik az elemzést. Így a HCV diagnózisa a fertőzés után 10-14 napon belül, ritkábban - 2,5-3 hét után lehetséges. A vizsgálat során követett céloktól függően az orvos meghatározott típusú vizsgálatot ír elő.

A következő típusú PCR létezik:

  1. Minőségi. A diagnosztikai vizsgálatok előírása során a betegeknek felmerül a kérdés, hogy mit mutat ez a kutatási módszer. A PCR módszerrel végzett kvalitatív elemzés egy nagyon érzékeny teszt, amely minimális koncentrációban meghatározza a vírus RNS jelenlétét a vérben. Jellemzően ezt a fajta polimeráz láncreakciót reverz transzkripciós technológiával hajtják végre. Ez azon kevés PCR-módszer egyike, amelyben az RNS célként használható.
  2. Mennyiségi. A hepatitis C mennyiségi meghatározása lehetővé teszi a vérben a HCV RNS pontos szintjének meghatározását. A kutatás csak egyetlen módon lehetséges - a valós idejű módszerrel. Az anyag PCR-re történő előkészítése során festéket adnak a mintához. Minden amplifikációs ciklus után automatizált, valós idejű kvantitatív vizsgálatot végeznek. A technikát gyakran fordított transzkripcióval kombinálva hajtják végre. Így lehetséges minőségileg meghatározni a vírus RNS-kópiáinak kis számát. A HCV RNS szintjének kvantitatív meghatározásához akkor van értelme, ha a kvalitatív PCR pozitív eredményt kap..
  3. Genotipizálás. Az elemzést a diagnosztikai folyamat utolsó szakaszában végzik. A vizsgálat elve a nukleotidszekvencia különbségén alapul, amely megkülönbözteti a hepatitis C vírus egyik genotípusát a másiktól. Az elemzést általában multi-primer (multiplex) PCR-rel végezzük.

Ha vírus hordozójának gyanúja merül fel, akkor kiváló minőségű PCR-t kell végrehajtani. Ha az eredmény negatív, akkor a személy valószínűleg egészséges. De a fertőzés teljes kizárása érdekében ajánlott 7-10 nap múlva megismételni a vizsgálatot. Ha a vírus RNS-ét kimutatják, további vizsgálatokat végeznek (kvantitatív és genotipizáló).

A laboratóriumi vizsgálat indikációi

A polimeráz láncreakciós módszerrel történő véradás fő indikációja a hepatitis C esetén egy pozitív enzim immunvizsgálat (típustól függetlenül: Összesen, differenciált IgG és IgM teszt).

Ezenkívül ellenőriznie kell:

  • terhesség alatt (a tesztet kétszer végezzük - az első trimeszterben és a születés előtt 7-10 héttel);
  • fokozott fertőzésveszély esetén (ápolónők, laboránsok, donorközpontok alkalmazottai, kozmetikusok stb.);
  • heves szexuális közösüléssel és ismeretlen személlyel való védtelen érintkezéssel;
  • a HIV, a rák, bizonyos gyógyszerek szedése stb. hátterében;
  • intravénás gyógyszerektől függő betegek;
  • invazív diagnosztikai vagy terápiás eljárások állandó lebonyolításával;
  • 1992 előtt végzett vérátömlesztéssel (korábban nem voltak megbízható módszerek a donor biológiai anyagának vírus jelenlétének ellenőrzésére).
  • amikor egy nyitott seb más vérével érintkezik, sterilizálatlan orvosi műszerekkel.

Az incidencia minden évben növekszik. Ezért a fertőzés korai felismerése érdekében ajánlott a HCV laboratóriumi vizsgálatait évente egyszer elvégezni..

Hol lehet tesztelni

A klinikával való kapcsolatfelvételkor a beteg ingyenes vizsgálatokra jogosult. De először ELISA tesztet tesznek. És csak pozitív vagy kétes eredménnyel mutatják be a PCR-vizsgálatot. Ezért sürgős diagnózist lehet felállítani egy fizetős laboratórium felvételével, ahol a beteg számára megfelelő időben adhat vért a PCR-hez. Ugyanakkor ajánlott azonnal ellenőrizni a májenzimek mutatóit, a szokásos klinikai vérparamétereket.

Általános szabály, hogy a vér PCR-vizsgálata szinte minden laboratóriumban elérhető. Ha a vérgyűjtő pont nincs felszerelve megfelelő felszereléssel, akkor a biológiai anyagot a hőmérsékleti viszonyoknak és egyéb feltételeknek megfelelően kutatás céljából szállítják. A klinikai PCR csak más vizsgálatok után lehetséges, amelyek eredményei közvetetten a hepatitis C jelenlétét jelzik.

Hogyan adjunk helyesen vért

Mielőtt vért adna egy lehetséges vírus kimutatására, számos szabályt be kell tartania az elemzés előkészítéséhez..

A fő szempontokat az emlékeztető jelzi:

  1. 5-7 napig hagyja abba a zsíros, sült ételek, az alkohol fogyasztását. Általában az orvosok javasolják az 5. számú diéta táplálkozási szabályainak betartását.
  2. Ne együnk 12-14 órával a vizsgálat előtt. Csak vizet inni lehet.
  3. Jobb reggel adni a vért..
  4. Az eljárás előtt ne dohányozzon.

Figyelmeztetnie kell az orvost a bevett gyógyszerekre, az esetleges egészségügyi problémákra, a krónikus betegségekre is..

A vért egy vénából veszik. Az eljárás befejezése után az ápoló steril vakolattal lezárja a szúrás helyét, figyelmeztet a kar meghajlításának szükségességére és 10-15 percig ebben a helyzetben tartására. Ellenkező esetben a fájdalmas hematoma valószínűsége magas..

Mennyi ideig tart a kutatás?

Az, hogy mennyi elemzést végeznek, a laboratóriumtól függ. Az átlagos átfutási idő 1-3 nap. Egyes klinikák fizetős szolgáltatást nyújtanak a gyors PCR-teszteléshez, azonban az időt korlátozzák az orvosi berendezések képességei..

A klinikán az eredményeket 7-10 napon belül el lehet juttatni az orvoshoz. Ez a betegek nagy beáramlásával jár. Ugyanakkor a biológiai anyagot minden követelménynek megfelelően tárolják.

Az eredmények dekódolása

Általános szabály, hogy a kiváló minőségű PCR dekódolása nem nehéz. De a félreértelmezés elkerülése érdekében a laboratóriumtól kapott űrlappal orvoshoz kell fordulnia. Az opciókat, amelyek ezt vagy azt a típusú PCR-t jelentik, a táblázat mutatja.

Negatív: az illető egészséges, vagy a vírus RNS koncentrációja a vérben túl alacsony a kimutatáshoz.

Pozitívum: az illető fertőzött

Akkor végezzük, ha kvalitatív kutatási módszerrel detektáljuk a vírus RNS-t.

A kapott vizsgálati eredményektől függően meghatározzák a vírusterhelés szintjét

Hepatitis C esetén végzett, más kutatási módszerekkel megerősítve.

Az elemzés lehetővé teszi a patológia kórokozójának pontos genotípusának megállapítását

De gyakran olyan helyzet áll elő, amikor a hepatitis C ELISA-értéke pozitív, a PCR pedig negatív. Csak az orvos tudja megfejteni az ilyen vizsgálati eredményeket..

Ilyen adatok azonban a következő esetekben lehetségesek:

  • terhesség;
  • akut formában átvitt hepatitis C;
  • HCV-kezelés befejeződött;
  • olyan fertőzések jelenléte, amelyek növelik a hamis pozitív ELISA eredmény valószínűségét.

Csak a polimeráz láncreakció mutatja a vírusfertőzés pontos jelenlétét a szervezetben. A negatív PCR hátterében a pozitív ELISA a legtöbb esetben azt jelzi, hogy az illető nem fertőzött. De az orvosnak meg kell határoznia a hamis pozitív eredmény pontos okát..

Minőségi elemzés

A hepatitis C kvalitatív PCR-elemzése megerősíti a kórokozó jelenlétét a vérben. Ha a vírus RNS-ét nem észlelik, az illető egészséges. De ha fertőzés gyanúja merül fel, ajánlott újra elvégezni a vizsgálatot. A pozitív eredmény fertőzésre utal. De ez az elemzés nem teszi lehetővé a krónikus hepatitis C és az akut megkülönböztetését, és nem tudja megmutatni, hogy a kóros folyamat mennyire aktív..

Mennyiségi teszt

A PCR-rel végzett kvantitatív elemzést a diagnózis megerősítését követően végezzük, és annak dekódolása fontos a kezelési taktika meghatározásához. A hepatitis C kórokozójának részecskék koncentrációjától függően a vírusterhelés több fokát különböztetjük meg: közepes, magas és alacsony. Minél magasabb az indikátor, annál súlyosabb a fertőzés, és annál nehezebb a terápia. Normális esetben a vírusos RNS nincs a vérben.

Genotipizálás

Számos laboratórium kvantitatív PCR-rel együtt végzi a genotipizálást, ami pénzt takarít meg. Ilyen vizsgálatot csak egyszer végeznek, a kezelés megkezdése előtt. Általában az elemzést a négy leggyakoribb genotípus (1, 2, 3 vagy 4) egyikére végzik. A HCV altípust egyidejűleg határozzuk meg. A hepatitis C 5. és 6. alfajának genotipizálása nem minden laboratóriumban lehetséges.

A PCR diagnosztika előnyei

A PCR módszerrel végzett diagnosztika széles körben elterjedt:

  • nagy pontosság (feltéve, hogy a legújabb generációs tesztrendszereket használják);
  • a biomédia mintavételének egyszerűsége;
  • gyors eredmények (maximum 5 nap).

De a fő előny a vizsgálat széles diagnosztikai képességeiben rejlik. Az elemzés nemcsak a vírus azonosítását teszi lehetővé, hanem a szervezetben lévő koncentrációjának pontos meghatározását és a fertőzés genotípusának megállapítását is. Ezenkívül kvantitatív kutatásokra van szükség az antivirális terápia hatékonyságának felméréséhez. A kezelés fő célja a teszt arányának (azaz a HCV RNS kimutathatatlan szintjének) elérése az antivirális kezelés 4, 12 vagy 24 hetében, és ennek az eredménynek a fenntartása.

A költség

A PCR-elemzés költsége régiónként változó. Tehát Moszkvában az árak magasabbak. A kiváló minőségű PCR 600-800 rubelbe fog kerülni, mennyiségi - 2200-3000 rubel, genotipizálás - 1000 rubelből. Pontosan megtudhatja, hogy egy adott tanulmány mennyibe kerül közvetlenül a laboratóriumban, egy orvosi szervezet honlapján vagy telefonon.

Minőségi elemzés a hepatitis C esetében: dekódolás

A vírusos hepatitis C kialakulásának oka a Flaviviridae családba tartozó kórokozóval való fertőzés. Hosszú időintervallum észlelhető a fertőzés és az antitesttermelés megkezdése között, ami nem teszi lehetővé a betegség időben történő diagnosztizálását enzim immunvizsgálattal.

A fertőzés gyanúja esetén a hepatitis C PCR-analízisét, biokémiát, CBC-t, májteszteket végeznek. A polimeráz láncreakcióval még a fertőzés első hetében is kimutatható a vírus a vérben, ami a módszer domináns előnye.

A hepatitis C kvantitatív és kvalitatív elemzése és a vizsgálat jellemzői, az előkészítés módja, hibák, dekódolás - részletesen megvizsgáljuk.

Mi a polimeráz láncreakciós módszer?

A polimeráz láncreakció egy molekuláris kutatási technika egy vírusos anyag genetikai anyagának meghatározására a fertőzés első napjaitól kezdve. Az elemzést nagyfokú megbízhatóság, specifikusság és pontosság jellemzi. Neki köszönhetően nemcsak a vírus hiányát / jelenlétét észlelik, hanem a vírusterhelést (mennyiségi érték), a genotípust is.

A vizsgálathoz a beteg vérére van szükség, amelyben feltehetően egy vírusfertőzés RNS-e található. Laboratóriumi körülmények között primereket adnak a biológiai folyadékhoz - ezek a kívánt gén rövid hosszúságú mesterségesen szintetizált fragmentumai. Plusz RNS-polimeráz - egy speciális enzim, amely megsokszorozza a kívánt anyag koncentrációját.

Ezenkívül a vért alkatrészek hozzáadásával egy speciális eszközben többször felmelegítik és lehűtik. Ezután következik a kapott eredmények elemzése, összehasonlítás a vírus ágens ismert génjeivel. Ez alapján következtetést vonnak le a betegségről.

A PCR kutatás fajtái

A hepatitis C PCR elemzését a laboratóriumban végezzük a szükséges reagensek hozzáadásával, három fajtája megkülönböztető jellemzőkkel rendelkezik:

  1. A hepatitis C kvalitatív PCR-elemzése a vizsgálat első szakasza. Rajta keresztül a kórokozó genetikai anyagát kimutatják a vérszérumban.
  2. A kvantitatív vizsgálat lehetővé teszi a vírusterhelés megbecsülését - ez a vírusanyag tartalma a beteg 1 ml vérében. A kezelés megkezdése előtt, majd 1-4-12 hetes terápia után végezzük. Ha a kúra hosszú, a hatékonyság felmérése érdekében a vizsgálatot 24 hetes terápia után kell elvégezni.
  3. Genotipizálás. A fertőző betegség gyorsan fejlődik, a vírus hajlamos a mutációra. Ezért szükséges azonosítani a vírus genotípusát.

A tudósok a vírus 7 genotípusát azonosították. Az Orosz Föderációban 1-2-3 faj nagyon gyakori.

Mindegyik genotípust a kezeléssel szembeni rezisztencia jellemzi.

Például az 1. típusnál a terápia hatékonysága körülbelül 60%, 2-3 típus hátterében a mutató eléri a 85% -ot.

A megfelelő gyógyszerek, a kezelés időtartamának megtalálásához meg kell határozni nemcsak a fertőzés tényét, hanem a vírus koncentrációját, genotípusát is.

Javallatok

A hepatitis, a PCR és az ELISA markerei, más vizsgálatok bizonyos orvosi indikációkkal rendelkeznek:

  • Amikor a beteg kórtörténetében HIV-fertőzés, AIDS.
  • Kapcsolat fertőzött személlyel, mivel a vírusos hepatitis nagyon fertőző.
  • A cirrhotikus májkárosodás tünetei - hepatomegalia, a lép méretének növekedése, vénás mintázat jelent meg a hason stb..
  • A funkcionális májbetegségek klinikai képe - periodikus / állandó fájdalom a jobb hypochondriumban, a bőr sárgulása, hányinger.
  • Az AST és az ALT magas értékei a vér biokémiájában.
  • Terhesség alatt, amikor a májfunkciós tesztek gyengék.
  • Mielőtt antivirális tanfolyamot kezdene a vírusterhelés meghatározása érdekében.
  • A terápia hatékonyságának figyelemmel kísérése.
  • Terápia után a vírusfertőzés megismétlődésének megelőzése.

A PCR-t a hepatitis B megerősített diagnózisával végzik, hogy kizárják a vegyes típusú májkárosodást.

Felkészülés a kutatásra és a mintavételre

Hogyan készülhet fel az elemzésre, az orvos megmondja. A pontos eredmény elérése érdekében a betegnek ajánlott az előkészítés. A következő ajánlásokból áll:

  1. Az elemzést reggel, éhgyomorra kell elvégezni. Vérvétel előtt csak tiszta, szénsavas vizet szabad inni. Utolsó étkezés - 8 órával a gyűjtés előtt.
  2. Ha reggel nem sikerül elvégezni a tesztet, akkor megteheti este vagy ebédidőben is, ami a legfontosabb - 5-6 órával étkezés után, nem korábban.
  3. 48 órával a vizsgálat előtt mondjon le alkoholos italokról, koffeintartalmú italokról és gyümölcslevekről.
  4. 2 napig diétát kell követnie, kizárva az összes káros terméket. Néhány orvos azonban úgy véli, hogy a zsíros, sült ételek nem befolyásolják a PCR-teszt pontosságát..

Ne szedjen gyógyszereket 24 órán át az orvosi manipuláció előtt. Ha ez nem lehetséges, értesítse orvosát. Az elemzést nem ajánlott azonnal elvégezni ultrahang, CT, masszázs és egyéb fizioterápiás eljárások után.

A vérvétel a következőképpen történik:

  • A páciens alkarján meghúzott speciális szorító segítségével az orvos leállítja a vénás véráramlást. A vénák jobban láthatóvá válnak, ami megkönnyíti a tű behelyezését, majd a vért.
  • A steril tű bevezetése előtti bőrfelületet alkoholtartalmú folyadékkal kezeljük.
  • A vénába tűt helyeznek, amely után egy kémcsövet rögzítenek rajta, amelybe a vér áramlik.
  • A tű behelyezése után a sûrût eltávolítjuk. Gyűjtse össze a szükséges mennyiségű vért, távolítsa el a tűt.
  • Az injekció beadásának helyére alkoholba mártott pamut törlőt visznek fel.

Annak elkerülése érdekében, hogy a tű beadási helyén zúzódás képződjön, elég erősen meg kell nyomni a vattapálcát a sérült területig, meg kell hajlítani a karját, és 3-4 percig ebben a helyzetben kell tartani..

Ha a beteg vért hígító gyógyszereket szed (Aspirin, Warfarin), akkor bizonyos problémák adódhatnak a vérzés leállításával.

A PCR előnyei más vizsgálatokkal szemben

A polimeráz láncreakciós módszer bizonyos előnyökkel jár más diagnosztikai technikákkal szemben..

A tanulmány előnyeit a táblázat ismerteti:

Tanulmány típusaLehetséges eredmény és a tervezett átirat
Kiváló minőségű PCR
Mennyiségi
Genotipizálás
A patológia kórokozójának közvetlen diagnózisaMás vizsgálatok lehetővé teszik számunkra, hogy választ adjunk - van-e kórokozó a testben, vagy sem. De PCR technikák alkalmazásával konkrétan meghatározhatja a vírusos ágens típusát.
Tanulmányi sajátosságA PCR egy egyedi DNS-darabot detektál, amely csak egyfajta vírusos ágensnek felel meg. Ez minimalizálja a hibák esélyét..
Nagyfokú érzékenységMég a vírus csekély koncentrációja is kimutatható a vérben.
Az összes kórokozó meghatározásaA kutatás során minden kórokozó kimutatható.
Látens fertőzésekA vírusos kórokozó mellett olyan fertőzések is kimutathatók, amelyek látens lefolyásúak, magas antigén aktivitással különböztethetők meg..

Ha a beteg pozitív eredményt kap, az azt jelenti, hogy a hepatitis kórokozójának genetikai anyagát megtalálták a biológiai folyadékban. Negatív összesen - a vírusnak nincs nyoma.

Az eredmények dekódolása

Az orvosnak meg kell fejtenie az eredményeket azon következtetés alapján, amelyet a beteg a laboratóriumban kap. Szükséges az adatok elemzése a biokémia, a CBC, az ultrahang mutatóival együtt.

Minőségi

Egy kvalitatív vizsgálat megmutatja, hogy az emberi vérben milyen vírusos kórokozó van vagy nem. Kétféle lehet - negatív (norm) vagy pozitív eredmény.

Az űrlap néha azt mondja: megtalált vagy nem található.

Pozitív eredmény - a laboratóriumi asszisztens azonosította a páciens vérében a vírus kórokozójának genetikai anyagát, a fertőzés beigazolódott. Negatív következtetés - nincs fertőzés, a vírus RNS-fragmensei az érzékenységi határok alatt vannak.

Mennyiségi

A kvantitatív elemzés az eredmények több lehetőségét is felveti. A kényelem érdekében táblázat formájában mutatjuk be őket..

EredményDekódolás
NegatívEz az egészséges ember szokása. Ez azt jelenti, hogy a vizsgált biológiai anyagban nincs vírusos hepatitis RNS, vagy a tartalma kisebb, mint az érzékenység küszöbértéke.
Legfeljebb 1,8 * 10 ^ 2 NE / mlAzt jelzi, hogy az RNS-tartalom kisebb, mint a kvantifikációs tartomány. Ezt az eredményt körültekintően kell értelmezni, mert ellentmondásos. Ezenkívül más vizsgálatokat is végeznek a későbbi összehasonlítás céljából. Ismételje meg a PCR-tesztet is.
Legfeljebb 8 * 10 ^ 5 NE / mlAlacsony vírusterhelés. Ez az eredmény általában azt jelenti, hogy a kezelés hatékony..
8 * 10 ^ 5 NE / ml-tőlMagas vírusterhelés. A kezelés azonnal szükséges (ha nem hajtják végre), vagy a gyógyszer korrekciója szükséges.
2,4 * 10 ^ 7 NE / mlAz RNS nagyobb, mint a felső kvantifikációs maximum. Egy ilyen eredmény hátterében a vírusterhelést nem ítélik meg. Egy második vizsgálatra van szükség biológiai folyadékminta hígításával.

Genotipizálás

Eredmény - egy specifikus genotípusú ribonukleinsavat találtunk. Ezen felül feltüntetik a genotípust és altípust, a laboratóriumi asszisztens latin betűkkel és számokkal kódolja a következtetést. Például az 1a genotípus. Összesen 7 genotípust, 67 altípust különböztetünk meg.

Eredmény - hepatitis C vírus RNS-t detektáltak - ez egy ritka genotípus DNS-je, amely nem tulajdonítható a gyakori vírusos szereknek, ezért további diagnosztikára van szükség.

Amikor a PCR negatív és az ELISA pozitív

Megdönti a laboratóriumi asszisztens hepatológus vagy fertőző betegség specialistájának következtetését. Mindig fennáll annak a veszélye, hogy hamis negatív vagy hamis pozitív eredményt kap. Néha előfordul, hogy a PCR negatív, az ELISA pedig pozitív.

Ez azt jelenti, hogy jelenleg nincs vírus a beteg vérében, de akut betegségben szenvedett. Általában úgy gondolják, hogy az ELISA olyan antitesteket mutat, amelyeket az immunrendszer termel a kórokozó testbe való behatolása után..

Az ELISA-t a PCR-hez képest alacsony megbízhatóság és megbízhatóság jellemzi, ezért elsődleges szűrésként használják. A vírusos hepatitis diagnosztizálásakor a polimeráz láncreakció elengedhetetlen.

A hepatitis C vizsgálatának költségei

Vizsgálatokat végezhet abban a kórházban, ahol a beteget megfigyelik, ha van ott laboratórium, vagy fizetett alapon elmehet egy magánközpontba.

Rövid idő alatt olyan laboratóriumi központokban érheti el az eredményt, mint a Gemotest, Invitro, Helix.

Kutatási költség a laboratóriumtól függően:

A laboratóriumi szolgálat neveÁrpolitika
Helix· A biológiai anyag mintavételének költsége - 170 rubel.

Minőségi + kvantitatív kutatás PCR módszerrel - 3990 rubel.

Vírusos betegség antitestjeinek kimutatása - 1500 rubel (2-3 nap).

A vírus aktivitásának ellenőrzése a terápia megkezdése előtt - 4090 rubel.

InvitroA hepatitis C vírus RNS mennyiségi kimutatása PCR-rel - 3140 rubel.

Biológiai anyag (vénás vér) gyűjtése - 199 rubel.

Vírusterhelés felmérése valós idejű detektálással - 18 000 rubel.

Kiváló minőségű ultrahangos vizsgálat - 3000 rubeltől.

Genotipizálás - 1250 rubeltől.

HemotestMennyiségi kutatási ár 2200 rubel.

Kiváló minőségű diagnosztika 700 rubeltől.

A kórokozó RNS-ének meghatározása - 4000 rubelből.

Vérminta vénából körülbelül 150 rubel.

A vizsgálat időtartama átlagosan 2-3 nap. Egyes laboratóriumokban sürgős elemzési szolgáltatás működik, költsége 1,5-2-szer magasabb. Arra is van lehetőség, hogy orvosi adót hívjon véradásra, és az eredményeket e-mailben vagy személyesen megkapja, amikor kapcsolatba lép a laboratóriummal.

A hepatitis PCR diagnosztikája: megfejtés, táblázat

A hepatitis PCR-elemzése - mi ez és miért történik

A PCR-elemzés lényege, hogy a vizsgált gén egy része kémcsőben kényszerül szaporodni speciális enzimek és körülmények felhasználásával. A hepatitis vírusok PCR-elemzése lehetővé teszi a vírustörzs meghatározását, amely nélkül lehetetlen hatékony kezelést végezni: mindegyik genotípus másképpen érzékeny az antivirális gyógyszerekre.

Kétféle PCR-t használnak:

  • minőségi;
  • mennyiségi.

A vírusellenes terápiát állandó ellenőrzés alatt kell tartani a kezelés időben történő kiigazítása érdekében; ezekre a célokra a polimeráz láncreakciót is alkalmazzák.

Minőségi és mennyiségi PCR

A hepatitis kvalitatív PCR-je megadja a választ: van-e vírustörzs a beteg vérében és melyik. A genotipizálás szükséges a betegség diagnózisának, prognózisának tisztázásához és a kezelés időzítésének meghatározásához.

A vírus jelenlétének igazolását követően a hepatitis kvantitatív PCR-jét végzik, amelynek segítségével kiszámítják a beteg laboratóriumi mintájában lévő RNS-molekulák számát..

A hepatitis PCR-elemzésének előkészítése

A polimeráz reakció módszerrel történő elemzéshez vénás vérre van szükség. Ezt reggel éhgyomorra kell elvégezni..

A betegnek megfelelően fel kell készülnie a vizsgálatra:

  • Az étel megtagadásához 10 órán át csak tiszta vizet inni lehet.
  • Előző nap hagyja abba az alkoholfogyasztást, ne dohányozzon 4 órán át.
  • A vizsgálat előtt kerülni kell a fizikai és érzelmi stresszt..
  • 2 napig hagyja abba a gyógyszerek alkalmazását, ha ez nem lehetséges, akkor figyelmeztetni kell a laboratóriumi asszisztenst. Néhány gyógyszer befolyásolja a végeredményt.

A hepatitis C PCR-elemzése

Ha a hepatitis C PCR-tesztje pozitív eredményt ad, ez azt jelzi, hogy a kórokozó mikroorganizmus folyamatosan osztja és fertőzi a májsejteket.

A hepatitis C későbbi kvantitatív PCR-jét nemzetközi egységekben mérjük 1 ml-enként vagy NE / ml-enként, ami azt jelenti, hogy a C vírus egy bizonyos törzsének ribonukleinsav hány példánya található 1 ml vizsgálati vérben.

Az alábbi táblázat a hepatitis C kvantitatív vizsgálatának dekódolását mutatja PCR módszerrel:

Vírusterhelés, másolatok / mlTerhelésértékelésA kórokozó replikációjának jellege
103 és kevesebbNagyon alacsonyInaktív
104 - 105AlacsonyGyakrabban inaktív
106.MérsékeltAktív
107.NagyNagyon aktív
  1. Az alacsony vírusterhelés jelzi, hogy a terápiás kezelést helyesen választják ki, és a hepatitis C gyógyulási prognózisa kedvező..
  2. A vírussejtek magas koncentrációja azt jelzi, hogy a betegség akut fázisban van. A beteg vére veszélyes fertőzésforrás.
  3. A vírusterhelés, amelynek mutatói átlagos szinten vannak, vagy a HVS krónikus stádiumát jellemzi, vagy két fejlődési tendenciája lehet: növekedése vagy csökkenése felé.

A hepatitis C kvantitatív PCR-elemzését a teljes antivirális terápia során végzik: 4, 12 és 24 hét után, amelynek célja a vírusterhelés csökkentése.

Végén - 6 hónap elteltével kontroll PCR-t végeznek.

A hepatitis B PCR-elemzése

A hepatitis B (B) PCR analízisét a fertőzés (HBV DNS) kimutatására végzik.

A HBV DNS-koncentrációt kópia / ml vagy me / ml-ben mérjük. A vizsgálat eredményeinek értékelése során a következő mutatókat kell irányítani:

  • 2x10 ^ 6 - az esetek kilencvenöt százaléka krónikussá válik.

A hepatitis PCR-elemzésének dekódolása

A kvalitatív PCR elemzésnek két válasza van:

  1. negatív;
  2. pozitív.

A PCR negatív azt jelenti, hogy a vérmintákban nem találtak kórokozót.

Az eredmény megbízhatóságának valószínűsége 95%. A fennmaradó 5% emberi hiba. Ez a lehetőség megengedett a tanulmányra vonatkozó magas követelmények miatt:

  • a reagensek tárolási szabályai;
  • az egészségügyi személyzet megfelelő képesítése;
  • biomaterial tisztasága.

Maga a PCR készlet 100% -os diagnosztikai pontossággal rendelkezik.

A hepatitis mennyiségi PCR-je lehetővé teszi a páciens testének vírusterhelésének meghatározását. Segítségével:

  • a betegség stádiuma meghatározott (akut, krónikus);
  • meghatározzák a vírusellenes kezelés hatékonyságát;
  • meghatározzák a májbiopszia szükségességét.

Bizonyos esetekben a beteg nem érzi a betegség jeleit, míg a PCR módszer megalapozta a fertőzést. Ez azt jelenti, hogy a betegség a fejlődés korai szakaszában van vagy krónikus formában van. A diagnózis tisztázása érdekében további kutatásokra van szükség az antivirális kezelés korai megkezdéséhez.

A PCR-diagnosztika költségei

A kormányzati klinikák ingyen végeznek vérvizsgálatot a PCR-re, ha van egy fertőző beteg vagy hepatológus beutalója.

Fizetett szolgáltatásokat nyújtanak a PCR-diagnosztikához az összes orosz nagyvárosban. A költség a teszt típusától, a rendelkezésre álló felszereléstől, az időzítéstől és egyéb tényezőktől függ.

  • Kiváló minőségű PCR-elemzés Moszkvában és Szentpéterváron 600–900 rubelbe kerül. A régiókban - 300-800 rubel.
  • A hepatitis C vírusterhelésének meghatározása 17 000-22 000 rubelbe kerül. A hepatitis B (B) esetében egy kvantitatív vizsgálat ára: 1200-10000 rubel.

A PCR módszer előnyei és hátrányai

Milyen előnyei vannak a polimeráz láncreakciós módszernek más diagnosztikai módszerekkel szemben?

  1. Alkalmazások széles köre. A PCR és a standard felszerelések segítségével bármilyen vírust azonosíthat.
  2. A kórokozó meghatározásának pontossága. Az enzimek és vizsgálati technikák különféle kombinációinak alkalmazásával a jelzett fertőzés 100% -os vizsgálati specifikációja érhető el.
  3. Nagy érzékenység. A technika lehetővé teszi egy vírusmolekula jelenlétének kimutatását a vérben.
  4. Hatékonyság. A kvalitatív elemzés néhány órán belül elkészül, a kvantitatív elemzés két nap alatt elkészül.
  5. A vírus diagnosztikája az inkubációs periódus alatt. PCR-rel a kórokozót nem az antitestek jelenléte határozza meg, amikor a test már rendelkezik immunválasszal, hanem a kóros folyamat megkezdése előtt, amely megkönnyíti a kezelést.

A PCR-elemzés hátrányai az előnyeinek következményei:

  • az elemzés tisztaságához a legmagasabb fokú tisztaságra van szükség, beleértve a laboratóriumi levegőt is, hogy "idegen" DNS ne kerüljön a vizsgált mintába;
  • magas követelményeket támasztanak a biológiai anyagok mintavételét és elemzését végző személyzet számára.

A kapott eredmények értékelését a kezelőorvosnak kell elvégeznie, aki tudja elkülöníteni az igaz elemzést a hamis pozitívtól (amikor a kezelés már befejeződött, de életképtelen vírus maradt a vérben) és hamis negatívból (amikor a vírust a klinikai kép nem fedezi fel)..

A hepatitis C PCR-elemzése

A krónikus vírusos hepatitis C (CVHC) diagnosztizálásához egy személy átfogó vizsgálata szükséges, amely magában foglalja a klinikai, laboratóriumi és instrumentális vizsgálatokat. A diagnózis szempontjából a helyes diagnózis felállításához fontos a PCR módszer - a polimeráz láncreakció..

Mit mutat ez az elemzés és miért van rá szükség?

Ez a laboratóriumi módszer kimutatja a hepatitis C vírus RNS-ét az emberi vérben. A vírus elleni antitestek enzimhez kapcsolt immunszorbens assayjével (ELISA) együtt PCR-t használnak a CVHC és annak kórokozójának genotípusának diagnosztizálására. Ez a tanulmány a laboratóriumi diagnosztika egyik legújabb módszere. Megbízhatósága a CVHC-ben meghaladja a 97% -ot, ami nagyon jó mutatónak számít a kutatás szempontjából.

A CVHC-nek három PCR-vérvizsgálata van: kvalitatív, kvantitatív és a vírus genotipizálása. Az első vizsgálat (kvalitatív elemzés) a vírusra a vérben észleli, ezért csak diagnózis felállítására szolgál.

A második (kvantitatív) vizsgálat meghatározza a test vírusterhelésének mértékét, ezért a terápia hatékonyságának monitorozására szolgál.

A harmadik PCR (genotipizálás) a vírus genotípusának megállapításával tisztázza a diagnózist, ami nagyon fontos a helyes vírusellenes kezelés kijelöléséhez..

A polimeráz láncreakció technikájának lényege olyan enzimek alkalmazása, amelyek megsokszorozzák a kórokozó genetikai anyagát a biomateriális anyagban. Az ilyen replikáció során egy véres kémcsövet többször felmelegítenek és lehűtenek az enzimatikus reakció felgyorsításához szükséges hőmérsékletre. Ezen manipulációk eredményeként a vírusgenom mennyisége sokszorosára növekszik, ami minimális mennyiség mellett is kimutatható.

A PCR diagnosztikának számos előnye van más laboratóriumi vizsgálatokkal szemben:

  • nagy érzékenység - 97-98%;
  • garantált analitikai specifitás (pontosan meghatározza a megtalálandó kórokozót, és nem a hozzá kapcsolódó törzset);
  • gyors végrehajtás (a vélemény megszerzése legfeljebb 2 napot vesz igénybe).

Három típusú PCR elemzés

Kiváló minőségű PCR-analízist írnak elő minden olyan betegnél, akiben ELISA-analízissel kimutatták a CVHC vírus elleni antitesteket. A kvalitatív PCR elvégzése után a válasz két változata kapható: "RNS detektált" vagy "RNS nem detektált". A vírus minimális mennyiségének kimutatásához a vérben legalább 50 NE / ml érzékenységű vizsgálati rendszerek szükségesek. Ha a vírus koncentrációja a páciens vérében kisebb, mint amit a diagnosticum képes meghatározni, akkor a teszt eredménye hamis negatív lehet. Az ilyen diagnosztikai hibák elkerülése érdekében a PCR-diagnosztikát végző laboratóriumokat rendkívül érzékeny vizsgálati rendszerekkel kell ellátni. Az "Invitro" laboratóriumban például 15 NE / ml érzékenységű teszteket alkalmaznak. A laboratóriumi dolgozók első kérésükre kötelesek információt nyújtani a vizsgálatok érzékenységéről a betegek és az orvosok számára..

A kvantitatív PCR-elemzés meghatározza a viremia mértékét, vagyis a kórokozó koncentrációját a vérben, a vírusterhelést. Ennek a vizsgálatnak az eredményét, szemben a kvalitatív PCR-rel, számokban fejezik ki, például 2 × 10 * 6 NE / ml, ami 2 millió nemzetközi egységet jelent 1 ml vérben. Egyes laboratóriumok más indikátort használnak - a példányszám / ml. Ez a két mutató könnyen konvertálható: 1 nemzetközi egység megegyezik az RNS 4 példányával. Így 2 × 10 * 6 NE / ml azt jelenti, hogy 1 ml-ben 8 × 10 * 6 vírusos RNS-kópiát találunk a beteg vérében, azaz. 8 millió példány 1 ml vérben.

A genotipizálás a vírus hat genotípusának egyike. A klinikai kép, a májból származó szövődmények kialakulásának üteme és a beteg jövőbeli életének előrejelzése a kórokozó genotípusától függ. A vírus genotípusa már a diagnózis fázisában nagyon fontos, mivel a gyógyszerek kombinációja és a beteg számára felírt terápiás kúra időtartama annak helyes meghatározásától függ..

Azonban egy ilyen "ideálisnak tűnő" laboratóriumi vizsgálatnak is vannak hátrányai:

  • a vizsgálat során minden kórokozó, akár élettelen, genetikai anyagának replikációja megtörténik, ami torzíthatja az eredményt. Ezért a hatékonyság PCR alkalmazásával történő figyelemmel kísérésére az ismételt elemzést legkorábban 2 hónappal az előző után hajtják végre, hogy az elhalt vírusoknak legyen ideje "elhagyni" a beteg testét;
  • A vírusgenom egy része, amelyet a tesztrendszerek segítségével határoznak meg, elméletileg jelen lehet más vírusokban vagy mikroorganizmusokban, ezért hamis pozitív válaszra van lehetőség;
  • a vírusok gyorsan mutálódnak. Előfordul, hogy a vírus mutációjának sebessége és mértéke olyan magas, hogy a tesztrendszer leállítja genomjuk befogását. Ennek eredményeként hamis negatív eredmény lehetséges..

E hiányosságok enyhítése érdekében a PCR-diagnosztika laboratóriumi vizsgálati rendszereinek gyártói folyamatosan elvégzik tesztjeiket, beleértve a keresztreakciókat és a vírus adott genotípusára való érzékenységet is..

Hogyan lehet PCR-tesztet végezni a hepatitis C esetén?

Annak érdekében, hogy a vizsgálat PCR-módszerrel lezárható legyen, szigorúan be kell tartani a magatartására való felkészülés szabályait:

  • a vizsgálatot éhgyomorra végzik (az ételtől a véráramba jutó glükóz, zsírok, ásványi anyagok befolyásolhatják az enzimatikus reakció sebességét és minőségét);
  • az utolsó étkezés és az elemzés céljából vett vérminta közötti résnek legalább 8 órának kell lennie;
  • a vizsgálat előestéjén tilos alkoholt fogyasztani és zsíros ételeket fogyasztani, amelyek eliminációs ideje elhúzódik;
  • egy nappal a laboratóriumba lépés előtt kerülni kell az erős fizikai és érzelmi stresszt;
  • a dohányzás vérmintavételig nem ajánlott.

A hamis következtetések elkerülése érdekében az állítólagos betegnek valamivel korábban be kell jönnie a laboratóriumba, mint a vérminta. 15-20 percbe telik, mire az ember lélegzethez jut és megnyugszik. A gyors vérzés után a vérben lévő adrenalin befolyásolhatja a teszt eredményét.

Ha az elemzésre küldött beteg bármilyen gyógyszert szed, erről értesítenie kell az orvost. Lehetséges, hogy egy ideig el kell utasítania néhányat (ha lehetséges).

A hepatitis C PCR elemzésének eredménye

Az eredmények megfejtését az elemzést végző laboratóriumi laboráns végzi. A dekódolás az eredmény normától való eltérésének meghatározása. A mutatók normáját közvetlenül a vizsgálati rendszer gyártója határozza meg, amelyet a laboratórium diagnosztikai célokra használ. Ezért nem meglepő, hogy egyes laboratóriumokban a vírusterhelést NE / ml-ben, másokban - másolatokban / ml-ben határozzák meg..

Miután megkapta a következtetést, képesnek kell lennie a helyes értelmezésre. A vizsgálati eredmények értelmezésével a hepatitis C-ben szenvedő betegek kezelőorvosának kell foglalkoznia. Csak a beteg objektív, műszeres és laboratóriumi vizsgálatát követően az orvos elegendő mennyiségű adatot szerezhet a kapott PCR-eredmények kompetens értelmezéséhez..

A kvalitatív elemzés értékelése általában egyszerű, még a betegek számára is. Csak egy eredmény lehet: "talált" vagy "nem található". Sőt, a második közülük a norma.

A kvantitatív elemzést nehezebb értelmezni. Megmutatja a beteg vírusterhelésének mértékét. Még a hepatológusok körében sincs konszenzus a kimutatott virémia értelmezésével kapcsolatban. A legtöbb orvos hajlamos azt hinni, hogy a 8 × 10 * 5 NE / ml-nél nagyobb terhelést nagynak kell tekinteni. Nagyon nagy terhelésnek tekinthető az 1 × 10 * 7 NE / ml-nél nagyobb, az alacsony terhelés pedig kevesebb, mint 4 × 10 * 5 NE / ml..

A vírusterhelés mértéke a vírus virulenciáját (agresszivitását) jelzi: minél nagyobb a mennyisége a vérben, annál gyorsabban alakulhatnak ki a máj szövődményei. A vírus magas koncentrációja a terhes nő vérében növeli annak valószínűségét, hogy behatol a magzat vér-placenta gátján keresztül. A viremia befolyásolja a kezelés hatékonyságát is: alacsony szám esetén a terápia hatékonysága magasabb, mint a magas.

Annak érdekében, hogy megbizonyosodhassunk a hepatitis C PCR-elemzésének megbízhatóságáról, csak azokat a laboratóriumokat kell előnyben részesíteni, amelyek jól beválták magukat. Ugyanakkor az árpolitikának nem szabad elsődleges szerepet játszania..